移液枪是实验操作上不可缺少的工具,对于测试而言,重要的就是实验的误差最小,重复再现性好,那就要注意正确移液枪使用,避免因小失大。
一、移液步骤:
(1)装吸头:移液器套柄用力下压,需要时小幅度旋转即可。
错误操作:用力敲击吸头。此方法会带来吸头损坏甚至移液器套柄磨损,从而影响其密封性。
(2)量程设定:操作之前请先选择正确的移液器,移液器可在10-100%量程范围内操作 。
(3)润洗:用同一样品重复吸液排液二至三次,润洗为以后每次吸液提供相同的接触面,保证操作的一致性。注意:高温或者低温液体请不要润洗!
(4) 吸头浸入角度:吸液时尽量保持垂直状态,倾斜角度不能超过20°。
(5)吸头浸入深度:与使用的量程有关。
(6)吸头浸入时间:吸液后在液面中保持一秒钟再将吸头平缓移开,这对于大容量移液器或者吸取粘性样品尤为重要。
(7)吸液速度:匀速连贯移液,控制好移液速度,太快会造成喷液,液体或者气雾冲入移液器内部,污染活塞等部件。
(8)排液及吹液:先将活塞按至第一档排液,略作停顿后按至第二档进行吹液。
(9)手温:移液器不宜长时间握在手里,不用时最好将其挂在支架上或者挂在手上晾一下。
二、移液枪使用诀窍
1. 影响移液枪精度因素
(1)温度:室温低时,手温较高,使得空气膨胀,吸入冷溶液时往往发生误差
(2)气密性:tip和枪体的结合部,以及枪内柱体之间的长期磨损,造成误差
(3)吸速:容易造成tip内气泡产生,而且会污染枪头
(4)试剂的挥发:吸挥发性高的试剂时,蒸汽进入枪头,内压增高,结果在压出液体时,压力变大,而产生误差。解决办法:反复抽吸4-5次就可改善。
2. 使用注意事项
(1)吸取液体时一定要缓慢平稳地松开拇指,绝不允许突然松开,以防将溶液吸入过快而冲入取液器内腐蚀柱塞而造成漏气。
(2)为获得较高的精度,吸头需预先吸取一次样品溶液,然后再正式移液,因为吸取血清蛋白质溶液或有机溶剂时,吸头内壁会残留一层“液膜”,造成排液量偏小而产生误差。
(3)浓度和粘度大的液体,会产生误差,为消除其误差的补偿量,可由试验确定,补偿量可用调节旋钮改变读数窗的读数来进行设定。
(4)可用分析天平称量所取纯水的重量并进行计算的方法,来校正取液器,1mL蒸馏水20℃时重0.9982g。
(5)移液器反复撞击吸头来上紧的方法是非常不可取的,长期操作会使内部零件松散而损坏移液器。
(6)移液器未装吸头时,切莫移液。
(7)在设置量程时,请注意所设量程在移液器量程范围内不要将按钮旋出量程,否则会卡住机械装置,损坏了移液器。
(8)移液器严禁吸取有强挥发性、强腐蚀性的液体(如,浓酸、浓碱、有机物等)。
(9)严禁使用移液器吹打混匀液体。
(10)不要用大量程的移液器移取小体积的液体,以免影响准确度。同时,如果需要移取量程范围以外较大量的液体,请使用移液管进行操作。